大鼠 25 羥基維生素 D(25-OH-VD)ELISA試劑盒簡介
英文名稱: Rat 25-OH-VD ELISA Kit
實驗類型: 競爭法
檢測范圍: 3.13-200 ng/mL
靈敏度:1.4ng/mL
種屬: 大鼠
保存溫度: 2-8℃
樣本類型: 血清、血漿 和 其他生物液體
25-OH-VD 簡介:25 羥維生素 D(25-OH-VD)是維生素 D 在體內(nèi)的主要存在形式。維生素 D主要通過日照條件下皮膚合成,少部分可經(jīng)飲食獲得。維生素 D 為類固醇衍生物,屬脂溶性維生素,為環(huán)戊烷多氫菲類化合物。維生素 D 不僅僅影響鈣磷代謝,而且具有廣泛的生理作用,是維持細胞生長和發(fā)育的的物質(zhì),與多種疾病密切相關(guān)。維生素 D 在肝臟中通過羥基化作用轉(zhuǎn)化成 25-羥基維生素 D(25-OH-VD),然后在腎臟中轉(zhuǎn)換為具有活性的 1,25-二羥基維生素D.
實驗原理:本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被有大鼠 25 羥基維生素 D(25-OH-VD)抗體的微孔中,依次加入樣本、標準品、HRP 標記的抗原,中間經(jīng)過溫育和洗滌,用底物 TMB 顯色,TMB 在過氧化物酶(HRP)的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠 25 羥基維生素 D(25-OH-VD)呈負相關(guān)。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
靈敏度:1.4ng/mL特異性:可檢測樣本中大鼠的 25-OH-VD,且與其類似物無明顯交叉反.
在選取的健康大鼠血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清中加入3個不同濃度水平的大鼠25-OH-VD,計算回收率
樣本類型 | 范圍 | 平均回收率 |
血清(n=8) | 81-101 | 96 |
血漿(n=8) | 92-105 | 101 |
細胞培養(yǎng)上清(n=8) | 97-108 | 105 |
分別在選取的4份健康大鼠血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清中加入高濃度大鼠25-OH-VD,在標準曲線動力學(xué)范圍內(nèi)進行稀釋,評估線性。
稀釋比例 | 回收率(%) | 血清 | 血漿 | 細胞培養(yǎng)上清 |
1:2 | 范圍(%) | 83-95 | 88-96 | 90-110 |
平均回收率(%) | 91 | 93 | 96 | |
1:4 | 范圍(%) | 89-104 | 87-108 | 105-115 |
平均回收率(%) | 93 | 98 | 110 |
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